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【配置方案】大小鼠腦出血造模方案

日期:2013-03-26 20:46:31點(diǎn)擊:0
一、材料
  1. 動(dòng)物:大鼠或者小鼠
  2. 試劑:膠原酶(廠家:ThermoFisher)、生理鹽水
  3. 儀器設(shè)備和耗材,如下:
序號(hào) 貨號(hào) 型號(hào) 名稱 規(guī)格 單位 數(shù)量
1 10-0030 Nova1000 小動(dòng)物麻醉機(jī) 移動(dòng)型、異氟烷罐、POUR FILL、CAGE MOUNT。一體化集成功能配置:移動(dòng)支架、內(nèi)置氣源泵、抽氣泵、廢氣吸收罐、大小鼠預(yù)麻箱、抽屜箱、置物籃及管路 臺(tái) 1
2 10-2203   小鼠定位儀專用面罩-G2   個(gè) 1
3 10-2204   大鼠定位儀專用面罩-G2   個(gè) 1
4 30-1040 SR200D 腦立體定位儀 大鼠、雙臂、數(shù)顯 1
5 20-0100 Elite100 腦立體專用微量注射泵 0.5ul-100ul,注射回抽,觸屏 1
6 19-7010 FASTRONG 顱鉆 0-35000RPM順逆轉(zhuǎn),腳踏和手控,帶鉆頭 1
7 16-0050 FOI304 LED冷光源 色溫6000K,35W光強(qiáng)可調(diào) 1
8 16-0003 SM200B 體視顯微鏡 搖臂式雙目 1
9 21-2000   HAMILTON注射器 5ul/700N/pst2尖頭/26sG/51MM 1
10 18-8010   大腦手術(shù)器械包 13件套 1
11 18-8090   動(dòng)物手術(shù)消毒套裝 7件套 1
12 19-7001   小動(dòng)物剃毛器   1
13 19-7223   紅霉素眼膏 0.5%*2G(5支/包) 1
14 10-3022   氣體吸收罐 #S,6個(gè)/箱 1
15 10-3026   活性炭 6袋/箱 1
16 24-0058   平衡木 1.25M 1
17 26-0080 HG620 爪抓力測(cè)試儀   1
18 26-0010 HR420M 轉(zhuǎn)棒儀(6只小鼠)   1
19 26-0020 HR420R 轉(zhuǎn)棒儀(4只大鼠)   1
 

二、方法(以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象)
  1. 準(zhǔn)備成年wistar大鼠,體重250-300g,禁食12h,禁水6h;
  2. 使用氣體麻醉機(jī),將動(dòng)物放入預(yù)麻箱,異氟烷快速深度麻醉;
  3. 取出動(dòng)物,將動(dòng)物頭部固定于立體定位儀上(安裝有定位儀專用麻醉面罩),接通氣體麻醉機(jī),使動(dòng)物維持麻醉,即可開(kāi)始手術(shù);
  4. 老鼠眼部涂紅霉素眼膏,以防干裂;
  5. 老鼠頭部備皮,酒精和碘伏棉球消毒后,頭皮正中切口,剝離骨膜,確定前囟參考零點(diǎn)坐標(biāo),然后移動(dòng)定位儀X和Y軸操作臂(右臂),定位到前囟后1mm,中線偏左3mm處,顱鉆鉆直徑0.6mm的小孔;
  6. 進(jìn)一步用固定在立體定位儀左臂的微量注射泵(裝有注射器和藥物)沿小孔中心位置,垂直緩慢進(jìn)針,進(jìn)針深度6mm(左側(cè)尾狀核的位置),設(shè)置注射參數(shù),緩慢注入膠原酶VII0.5U(用生理鹽水配成1U/uL),注藥后留針10分鐘;
  7. 注射完畢,縫合皮膚,回籠飼養(yǎng),給予正常進(jìn)食進(jìn)水,室溫控制在25度左右。
  8. 術(shù)后觀察神經(jīng)癥狀體征。

三、模型評(píng)判
  1. BBB觀察評(píng)分:據(jù)Berderson等的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)分為三級(jí)。I級(jí):將大鼠尾巴提起來(lái),癱瘓側(cè)前肢回收后屈曲于腹下,正常側(cè)前肢向地面伸展;II級(jí):除以上體征外,向癱瘓側(cè)推大鼠時(shí)阻力較對(duì)側(cè)明顯降低;III級(jí):除以上癥狀外,大鼠有向患側(cè)側(cè)旋的行為。出現(xiàn)以上癥狀為造模成功;
  2. 儀器測(cè)評(píng):平衡木、爪抓力和轉(zhuǎn)棒,與動(dòng)物協(xié)調(diào)性、力量性指標(biāo)相關(guān)儀器進(jìn)行測(cè)量。


 

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